CB系列程序降温盒使用问题解答
CB系列程序降温盒简介
无醇程序降温盒通过精确控制降温速率,实现生物样本缓慢从室温至-80℃的梯度冷冻过程,从而保持细胞活性和功能。这种降温盒利用高度隔热的保温材料配合内部金属模块的精准匹配来控制散热速度。

作为一种无醇的程序降温盒,翊尘生物X-CTS CB系列在材料选择和产品设计上又与其它产品有所不同。保温性能更好的材料是产品的尺寸更加小巧灵活且寿命更长;相变过程冻融次数更少、相变时间时间更短,则能更好地保护细胞。

软件模拟CB系列降温过程,中间温度波动过程为相变过程
l CB5-18是否可以用于小体积(1.2mL、2mL等)冻存管?为什么?
可以。这个取决于无醇程序降温盒的导热原理。CB系列产品的导热主要通过侧面,导热方式为热转导+热对流。由于1.2mL、2mL冻存管的直径与5mL一致,高度不同,在导热参数上没有明显差异,使用效果上,采用CB5-18与2mL专用的程序降温盒的冻存效果差异不太大。

l 为什么细胞在冻存前细胞活率很高,冻存后下降严重?
细胞冻存过程影响细胞活率的因素很多:比如冻存液成分、程序降温过程的方案选择、细胞耗材及装入体积、细胞加入冻存液之后/程序降温后/复苏前几个阶段的转移方式等。
细胞对高浓度(≥10%)DMSO敏感,尤其是温度较高时,暴露几分钟都会对细胞膜造成较大损伤,细胞信号转导、蛋白激酶活性、膜通透性都会受到影响。而且DMSO稀释过程会释放大量热,也会对细胞造成损伤。因此建议提前预混好冻存液,预冷;细胞放入冻存液后快速进行程序降温;如冻存样本多,无法第一时间进行程序降温,建议放入冰上或4°C冰箱短暂保存。
转移过程如果时间较长可能会造成容易被忽略的伤害。如果样本数量多、液氮罐-细胞房、-80℃冰箱/程序降温仪距离液氮罐距离长、细胞房更衣繁琐造成细胞转移过程快速升温,也可能影响细胞的活率。建议细胞转移放在干冰或者液氮上进行。可选择便于转移的装置避免升温过程。
另外,细胞的计数需要排除DMSO的影响。因DMSO本身会造成细胞通透性增加,导致台盼蓝等染料进入细胞内,在计数前需要把DMSO更换掉再计数,得到的结果才更准确。
l 冻存袋用程序降温盒在-80℃冰箱里是竖放还是横放?
CB50-2程序降温盒用于CS25或CS50冻存袋的冻存,这两种袋子建议装袋体积一般10-25ml,不超过30mL。冻存袋需要先放入保护铝盒,在放入程序降温盒或降温仪冻存。铝盒的厚度(内侧)约10mm,竖放细胞液体会按照盒体的形状形成接近10mm的厚度,体积相对较小时,横放液体厚度会小很多(如10ml时平均3mm左右厚),热量更易导出,细胞活性会好于竖放;如液体体积很大时(如30mL),横放和竖放影响不大。注意横放一定要在底部放一个透气好的试管架,便于热量导出,周围也要留出10厘米以上的空间导热。如一次冻存多个样本,降温盒可叠放,2个盒子之间也需要加上便于导热的架子。
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